Este exame permite a tipificação HLA com a identificação dos alelos HLA-DQ e revela associação ao desenvolvimento de Narcolepsia. Pacientes que possuem o alelo HLA-DQB1*06:02 tem maior chance de desenvolver Narcolepsia que pacientes que não possuem o alelo. A narcolepsia é uma doença crônica de causa genética auto-imune com disfunção da neurotransmissão das hipocretinas.

A metodologia usada no exame é PCR-SSOP.

O DNA é extraído de sangue periférico ou saliva de forma automatizada (QIASymphony). A tipagem HLA pelo método de “Polymerase Chain Reaction – Reverse Sequence Specific Oligonucleotide Probe” (PCR-SSOP) é baseada na amplificação específica de éxons do gene HLA utilizando primers biotinilados. Após a amplificação, os fragmentos são hibridados com beads marcados com sondas específicas. Após isto, um marcador fluorescente é acrescentado à reação para identificação das beads positivas e negativas. A leitura é realizada em um citômetro de fluxo que identifica a positividade de cada bead bem com sua especificidade. O resultado é analisado utilizando um software que interpreta a positividade de cada bead e compara com um banco de dados e seleciona o resultado da amostra.

A técnica de PCR-SSOp “Polymerase Chain Reaction – Reverse Sequence Specific Oligonucleotide Probe” resulta em tipificações HLA em média resolução.

• PCR para HLA Locus DQ (Média resolução)